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艾森产品在细胞免疫研究中的作用

传统的细胞免疫杀伤检测方法为51Cr或111ln进行放射性标记分析。这些方法中,靶细胞被放射性同位素标记,然后与效应细胞混合。在给定时间检测放射性同位素的释放。也可用其他非放射性标记方法如流式细胞术、基于ELISA的颗粒酶测量,及利用显微镜进行形态学分析。RTCA技术在无需任何标记的情况下,可实现动态检测免疫细胞杀伤检测及最佳效靶比评估。RTCA技术基于电阻抗原理,针对贴壁细胞生物学表性进行检测,而对于加入孔内的悬浮细胞,因其不与检测板底面电极接触或近视微弱接触,所以不会引起电阻抗变化。因此,NK细胞介导的单层癌细胞杀伤可直接利用RTCA技术进行定量监测,同时,为细胞治疗的高通量筛选及基础研究提供高质量,重现性好的数据支持。RTCA进行细胞免疫检测的原理如下图所示 

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需要指出的是,目前细胞免疫研究中应用最广泛的流式检测具有一定的不完整性,由于流式检测免疫细胞表面受体表达情况,而受体表达情况并不能与细胞的杀伤能力直接相关,因此可能会导致片面结果。即免疫细胞表面受体表达-质控合格,但细胞杀伤能力不一定合格。提示单纯的流式质控程序并不全面,需要与RTCA的细胞杀伤质控结果组合,方可更全面的评价免疫细胞活化情况,并以此决定免疫细胞是否符合回输病人的标准(如下面结果所示)  

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上面表格3例病人进行CIK疗法,T cell经过活化后,CD3+CD56的表达率均大于10%,即流式质控合格,然而这3例病人的T cell对HepG2及Bel7402的杀伤率均小于50%,远低于研究中150例病人的平均杀伤率,提示这3例病人的T cell不符合回输的标准。
基于上述RTCA的检测优势及与Novocyte智能流式细胞仪的结合,可以提供给细胞免疫研究者完整的质控技术平台,从而快速高质量的进行细胞免疫研究。

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上图为RTCA技术实时无标记检测CAR-T细胞对A549细胞杀伤能力,简单客观获得细胞杀伤动力学数据,为细胞免疫研究提供高质量数据