双特异性T细胞和双特异性抗体

什么是双特异性抗体和双特异性T细胞?

抗体依赖性免疫细胞介导的细胞毒性(ADCC)技术的局限性在于,并不是所有的免疫细胞都表达CD16受体。特别是细胞毒性T细胞和辅助性T淋巴细胞均不表达CD16,因此与相应抗体共同作用,并不会发挥免疫杀伤作用。

为了克服这种局限性,加强适应性免疫系统对肿瘤细胞的杀伤能力,双特异性抗体设计便应运而生。经过改造的双特异性抗体一方面可以与肿瘤细胞表面的特异性抗原结合;另一方面则可以通过CD3受体和T细胞结合,以此激活细胞毒性T细胞和Th细胞的杀伤效应。这种方法具有绕过MHC介导的T细胞活化的优点,并且有可能针对肿瘤细胞表面表达的任何抗原发挥免疫杀伤作用。虽然非常多的双特异性抗体已经被研究并报道,但其中一种是特别有前途的,即双特异性T细胞,其识别靶点为恶性B肿瘤细胞的CD19抗原,该技术最近FDA评价为“突破性疗法”。

应用案例: EpCAM受体为靶向的BiTE

使用xCELLigence RTCA评价BiTE介导的的免疫杀伤活。研究者使用以EpCAM为靶点(这一受体表达于上皮来源的大多数肿瘤细胞,包括PC3细胞)的BiTE与外周血淋巴细胞共同作用与前列腺肿瘤细胞(PC3)。在外周血淋巴细胞与PC3细胞比值为20:1时,EpCAM / CD3 BiTE体现了剂量依赖性的细胞杀伤作用(左图)。虽然BiTE在最低浓度仍然可以激活免疫细胞对PC3细胞的杀伤,但对PC3细胞的杀伤被推迟。

EpCAM BiTE介导的PC3细胞免疫杀伤实验。PBMCs对PC3细胞的杀伤评估(效靶比20:1),处理方式为加入同时识别EpCAM(表达于PC3细胞)和CD3(表达于PBMCs)的BiTE。实验考察的所有BiTE浓度均体现了明显的PBMCs活化和对PC3的杀伤作用,即CI数值降低(左图)。通过计算Cell Index值减低50%(ET50%)可以计算不同的效靶比和BiTE的浓度(右图)。数据来源:未公开发表的ACEA数据。

使用xCELLigence监控ADCC核心优势

1无标记:更接近细胞生理条件,不需要标记物或二次分析。

2 实时:短时程(小时)和长时程(日)杀伤动力学定量监测。

3 高敏:可对低效靶比的杀伤实验进行有效评估。

4 简单的工作流程:只需要在靶细胞检测孔中添加效应细胞(在有或无抗体的情况下),不需要额外的样品处理。

5 自动数据处理:RTCA软件自动进行数据显示和分析,排除影像学方法的主观影响。