细胞迁移

运用案例1:卵巢癌球体侵袭间皮细胞研究

一旦卵巢癌细胞流入到腹膜液后,便会聚集、粘附到腹膜内层,并随之侵入形成继发性肿瘤。这种癌转移过程极其复杂性,故其定量化的研究尤为困难。在图1中,研究者通过在CIM-Plate上室的底部铺了一层matrigel和一层间皮细胞,对腹膜内层进行模拟。然后使用xCELLigence RTCA DP系统,实时定量检测癌球体通过这层腹膜的趋化侵袭作用。

图1,癌球体实时迁移实验。(A)实验示意图。为了模拟卵巢癌细胞侵袭腹膜内层的微环境,首先在CIM板的上室底部铺一层matrigel胶,然后铺上单层LP9间皮细胞,最后将卵巢癌球体接种在LP9单细胞上层。(B)LP9单细胞层,卵巢癌球相差显微拍摄图像。(C)24小时后,定量分析卵巢癌球体侵袭能力。CIM-Plate下室中加无血清培养基(SFM)或全培养基(含FBS,趋化因子)。无癌球体的情况下,LP9细胞无侵袭能力。(D)在与(C)相同实验条件下,用RTCA技术实时连续检测35小时的曲线。图片来源于J Vis Exp. 2014 May 20;(87)

尽管上述只对卵巢癌的侵袭进行了研究,但同样的方法也适用于其它癌症,如乳腺癌转移,肿瘤内皮层侵袭等。同时还可用于正常细胞侵袭研究,如胚胎移植时,滋养层细胞的侵袭过程。

使用xCELLigence系统检测细胞侵润和迁移的优点

1、 实时定量检测细胞侵袭;

2、 无需细胞标记、固定、染色或者其他处理步骤,极大减少手动操作;

3、 易定量细胞迁移和浸润的动力学进程;

4、 细胞密度和胞外基质浓度等实验条件快速优化;

5、非侵入方法,膜两侧的细胞均可用于后续的实验分析(如图像、RT-PCR等)。