NK细胞介导的细胞溶解

什么是NK细胞

自然杀伤(NK)细胞是一种在先天免疫系统中发挥着重要作用的细胞毒性淋巴细胞,其主要作用是识别和摧毁受病毒感染的细胞。NK细胞可以表达一系列激活和抑制受体,这些受体可以有效的帮助NK细胞对感染/病变和正常细胞进行区分。当NK细胞接近靶细胞时,便会被激活并分泌穿孔素和颗粒酶,从而引起靶细胞凋亡或渗透溶解。NK细胞识别和破坏受感染细胞的这一机制也是杀死癌细胞的关键。

不同于T细胞必须通过抗原呈递才能识别肿瘤细胞,NK细胞在体内和体外条件下,都无需活化便可直接杀伤某些类型的肿瘤细胞。肿瘤细胞与病毒感染的细胞类似,同样辉下调其MHC-I蛋白的表达。NK细胞通过识别这些MHC-I蛋白表达的变化,释放出穿孔素/颗粒酶,从而造成靶细胞溶解死亡。由此,NK细胞成为了目前细胞治疗研究的热点之一。

应用案例:NK-92细胞介导的MCF7乳腺癌细胞溶解

如图所示,研究者使用xCELLigence RTCA实时无标记细胞分析技术实时检测NK细胞介导的细胞溶解过程。MCF7细胞先铺在E-Plate检测孔内生长约48h,随后按照不同效靶比(效应细胞与靶细胞的比例)加入NK-92细胞。结果显示NK-92细胞对MCF4细胞具有明显的杀伤作用,且不同效靶比和时间段内,杀伤的CI曲线分化明显。(左图和右图)。

重要的是,xCELLigence系统的检测灵敏度非常高,即使在低效靶比的情况下,仍然可以区分免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。为了方便结果的描述,我们使用杀伤率来衡量NK-92 细胞对MCF7细胞的杀伤作用。杀伤率=(靶细胞CI-效应细胞的CI)/靶细胞CI X 100%

实时无标记检测NK-92细胞介导的MCF7细胞溶解实验。MCF7贴壁生长约48h,然后加入不同效靶比的NK-92细胞,之后检测约20h。结果显示NK-92细胞可以时间依赖性的在不同效靶比下杀伤MCF7细胞(右图)。

使用xCELLigence技术检测T细胞介导的细胞杀伤的核心优势:

1无标记:更接近细胞生理条件,不需要标记物或二次分析。

2 实时:短时程(小时)和长时程(日)杀伤动力学定量监测。

3 高敏:可对低效靶比的杀伤实验进行有效评估。

4 简单的工作流程:只需要在靶细胞检测孔中添加效应细胞(在有或无抗体的情况下),不需要额外的样品处理。

5 自动数据处理:RTCA软件自动进行数据显示和分析,排除影像学方法的主观影响。